University of Khartoum

Assessment of Calretinin Immunohistochemistry As A Diagnostic Tool In Hirschprung’s Disease Among Sudanese Patients In Soba University Hospital

Assessment of Calretinin Immunohistochemistry As A Diagnostic Tool In Hirschprung’s Disease Among Sudanese Patients In Soba University Hospital

Show simple item record

dc.contributor.author Mohamed, Alaa Hatim Ameer
dc.date.accessioned 2019-09-23T08:20:17Z
dc.date.available 2019-09-23T08:20:17Z
dc.date.issued 2018
dc.identifier.uri http://khartoumspace.uofk.edu/123456789/27129
dc.description 141 Pages
dc.description.abstract Background and Objective: Hirschsprung’s disease (HSD) is a common congenital disorder that results from absence of parasympathetic ganglion cells in the intramural and submucosal plexuses. It is the most common cause of organic constipation worldwide and it diagnosed early in life. The diagnosis is mainly based on histopathological examination of suction biopsies. This study aims at evaluating calretinin expression, and its specificity and sensitivity in different bowel segments and biopsies as a cost effective and more accurate method for diagnosis of HSD compared to the conventional H&E stain. Calretinin is a calcium binding protein that shows strong nuclear and cytoplasmic staining of ganglion cells and nerve fibers and negative staining in HSD. Materials and Methods A sample of 100 patients was obtained from Soba University Hospital during January 2013- December 2017. Of these, 98 were diagnosed with HSD histopathologically with different types of biopsies (44 suction rectal biopsies, 42 pull through operations, (20 narrow segments, 22 dilated segments), and 14 colostomy site biopsy). Additional 3 samples near the dentate line were considered as control. H&E slides were reevaluated and calretinin immunostain was performed on paraffin embedded blocks and seen by the researcher, supervisor and co-supervisor.   Results: 100 cases were evaluated, their age range (1 day-23 yrs), the most common age group for HSD is 1 day to 5 years (72%), with male to female ratio of (4.8:1). The rectum is the most common site of involvement (44%) followed by rectosigmoid colon (28%). Chronic constipation turned out to be the most common clinical presentation (49%), followed by abdominal distension (13%) and delayed meconium passage (8%). In 61% cases diagnosis of HSD is based on clinical features, radiological studies and histopathological evaluation for absence of ganglion cells. Of 44 rectal suction biopsies examined, H&E showed presence of ganglion cells in 8 (18.2%) and absence in 36 (81.8%), while calretinin showed positive staining in 3 (6.8%), negative in 39 (88.6%) and weak positive staining in 2 (4.5%) which are considered immature ganglion cells, (p= 0.03). In the 42 pull through bowel segments, H&E showed presence of ganglion cells in 21 (50%) and absence in 21 (50%), while calretinin showed positive staining in 20 (47.6%) and negative staining in 22 (52.4%), (p= 0.00). Of the 14 colostomy biopsies evaluated, 12 (85.7%) showed presence of ganglion cells and 2 (14.3%) absence of ganglion cells, while calretinin showed positive staining in 13 (92.9%) and negative in 1 (7.1%), (p= 0.011). Nerve fibers were evaluated in all samples examined, 7showed weak positive expression for calretinin and were considered as transitional zone between ganglionic and aganglionic segments. Calretinin showed very high sensitivity and specificity compared to H&E stain in all samples examined. In suction biopsies, calretinin showed 95.1% sensitivity and 100% specificity while H&E showed 85.3% sensitivity and 66% specificity. In pull through and colostomy biopsies, calretinin showed 100% sensitivity and 100% specificity while H&E showed 93.9% sensitivity and 91.3% specificity. Conclusion: Calretinin immunohistochemistry is not only cost effective, but is also a more accurate method for diagnosis of HSD in all types of biopsies with very high sensitivity and specificity and no false positive or negative results. en_US
dc.language.iso en en_US
dc.publisher University of Khartoum en_US
dc.subject Hirschsprung’s Disease; Immature Ganglion Cells; Total Colonic Agangliosis; calcium en_US
dc.title Assessment of Calretinin Immunohistochemistry As A Diagnostic Tool In Hirschprung’s Disease Among Sudanese Patients In Soba University Hospital en_US
dc.type Thesis en_US
dc.Degree MD clinical
dc.Supervisor Nadia I. A. ElDawi
dc.co.Supervisor Sawsan Abdel Rahim
dc.description.arabic-abstract الخلفية والأهداف: مرض هيرشبرنج هو مرض خلقي شائع ينتج من نقص في الحركة الدفعية المنسقة التي تتم في لقصي جزء من الامعاء الغليظة نتيجة لفقدان الاعصاب الكابحة الداخلية والتي تنتج بدورها من غياب الخلايا العقدية بالجهاز العصبي نظير الوديفي الضفائر العصبية الداخلية وتحت المخاطية. يعتبر من أهم أسباب الامساك العضوي في العالم ويتم تشخيصه فياول سنين من الحياة. يعتمد التشخيص علي فحص الأنسجة للتأكد من غياب الخلايا العقدية. خزعة شفط المستقيم تعتبر اللأجراء المفضل الذي يعتمد عليه التشخيص’ ولكن هنالك محددات لهذه العملية عند استخدام الصبغة العادية نتيدة لعذم نضج الخلايا العقدية عند الاطفال والمواليد وتحتاج للعديد من الاجزاء قبل التشخيص’ ولذلك تعتبر مستهلكة للوقت ونحتاج اتطوير طريقة جديدة و دقيقة للتشخيص. الهدف من هذه الدراسة تقييم النوعية والحساسية لصبغة مناعية جديدة في اجزاء مختلفة وعينات مختلفة من الامعاء الغليظة والتي تعتبر دقيقة وفعالية من حيث التكلفة بالمقارنة مع الصبغة العادية. المواد والطرق: تمت هذه الدراسة في جميع العينات المشخصة بالمرض في مستشفي سوبا الجامعي في الفترة من يناير 2013- ديسمبر 2017وتم تسجيل جميع الاعراض السريرية واجراء الفحص النسيجي لجميع العينات بالصبغة العادية والصبغة المناعية. النتائج: تمت دراسة مائة عينة من مائة مريض ووجدنا ان اكثر الفئات العمرية التي تصاب بالمرض من عمر يوم الي عمر خمسة سنوات وتمثل (72%)’ نسبة الذكور الي الاناث (4.8 : 1) ويعتبر المستقيم اكثر موقع معني بالمرض (44%) يعقبه السيني المستقيمي (28%). يعتبر الامساك المزمن هو اكثر الاعراض السريرية للمرض (49%) يعقبه انتفاخ البطن (13%) ثم تأخر مرور العقي (8%). تشخيص المرض يعتمد علي الاعراض السريرية والدراسات الاشعاعية الفحص النسيجي لغياب الخلايا العقدية (61%). تم تقييم 44 عينة من خزعة شفط المستقيم حيث وجدت الخلايا العقدية في 8 (18.2%) من العينات ولم توجد في 36 (81.8%) بالصبغة العادية’ اما الصبغة المناعية فقد كانت ايجابية في 3 من العينات (6.8%) وسلبية في 39 (88.6%) وهنالك عينتان (4.5%) أظهرت ايجابية ضعيفة. تم تقييم 42 عينة من عينات سحب الامعاء حيث أظهرت الصبغة العادية الخلايا العقدية في 21 عينة (50%) ولم تظهر في 21 (50%) من العينات’ اما الصبغة المناعية فقد كانت ايجابية في 20 (47.6%) وسلبية في 22 (52.4%). تم تقييم 14 عينة من عينات فغر القولون حيث اظهرت الصبغة العادية الخلايا العقدية في 12 (85.7%) ولم تظهر في 2 (14.3%) اما الصبغة المناعية فقد كانت ايجابية في 13 عينة (92.9%) وسلبية في عينة واحدة (7.1%). تم تقييم الالياف العصبية في جميع العينات ووجدنا 7 من العينات اظهرت ايجابية ضعيفة وتم اعتبارها المنطقة الواصلة بين الجزء العقدية والغير عقدية. الصبغة المناعية أظهرت ايجابية قوية في الألياف العصبية ونواة وسايتوبلازم الخلايا العقدية في جميع الأجزاء العقدية وأظهرت سلبية قوية في جميع الأجزاء غير العقدية في جميع العينات. هنالك عينتان من خزعة شفط المستقيم أظهرت ايجابية ضعيفة وتم تصنيفها خلايا عقدية غير ناضجة. الصبغة المناعية أظهرت نوعية وحساسية عالية بالمقارنة مع الصبغة العادية في جميع العينات التي تم فحصحها. الخلاصة: الصبغة المناعية تعتبر دقيقة وفعالية من حيث التكلفة وحفظ الوقت لتشخيص مرض هيرشبرنج في جميع العينات المختلفة ولها نوعية وحساسية عالية.

Files in this item

Files Size Format View

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record

Share

Search DSpace


Browse

My Account